3 讨论
表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)是一个相对分子质量为170×103的跨膜糖蛋白受体，所编码的蛋白质属于I型跨膜酪氨酸激酶生长因子受体，分布在血管和表皮细胞膜上，它包括膜外区、跨膜区、膜内区3个部分［13］。当配体和受体膜外部分结合后，形成结合位点激活EGFR,其作用是把增殖和生存信号传导到受体的下游信号传导途径中［4, 5］。EGFR是原癌基因cerB1（HER1）的表达产物，在多种肿瘤如结直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌和非小细胞肺癌等［1］中都有过度表达，当其活化后可以促肿瘤细胞粘附、浸润、增殖和肿瘤血管的生成［6］。由于EGFR在肿瘤细胞中的生物学活性，它已经成为新的抗肿瘤治疗的靶点。目前，阻断表皮生长因子受体功能的策略有两种：一种策略为针对EGFR胞外配体结合区的单克隆抗体，通过单克隆抗体识别受体的胞外区，竞争性地与配体结合，干扰EGFR的自身磷酸化及阻碍细胞表面EGFR二聚体形成，抑制信号转导系统激活，从而抑制肿瘤细胞增殖，代表药物如IMCC225等；另一策略为，用小分子化合物竞争结合EGFR酪氨酸激酶催化区的MgATP结合位点，抑制酪氨酸激酶活性，阻断激酶及其底物的磷酸化，彻底阻断异常的酪氨酸激酶的信号转导通路，从而达到抗肿瘤目的，其中的代表药物是ZD1839（商品名为Iressa）。
ZD1839是一种选择性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂，可以通过阻断信号传导途径而抑制肿瘤细胞的增殖和肿瘤血管生成，相关研究已经证实ZD1839对多种肿瘤均有抗肿瘤活性，而且不论是间断给药还是持续给药，都具有很好的耐受性［7］。在体外试验中，ZD1839对一系列肿瘤细胞株，如口腔癌、膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌和结肠癌细胞等显示出明显的抑制作用［8］，体内试验也证实其能抑制前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、小细胞肺癌和非小细胞肺癌等肿瘤的生长［9，10］，随后进行的临床研究表明其对非小细胞肺癌有着较好的治疗效果［7，11，12］，美国食品与药物管理局（FDA）也已批准ZD1839用于治疗晚期非小细胞肺癌。
宫颈癌的表皮生长因子阳性表达率很高，可达90%以上［13］, 因此推测针对表皮生长因子受体靶点的特异性抑制剂可能会有一定的治疗效果。
我们用MTT法检测ZD1839对宫颈癌Siha、Hela细胞的生长抑制作用。研究结果显示单独使用ZD1839对宫颈鳞癌细胞株Siha和腺癌Hela细胞株的增殖有明显的抑制作用，并且这种作用呈剂量依赖性。我们研究发现，ZD1839抑制Siha、Hela细胞增殖的IC50值分别是1.48μmol/L、2.67μmol/L，与Ranson［8］报道的ZD1839抑制其他类型肿瘤细胞系的IC50值范围一致。
ZD1839与多种细胞毒药物化疗联合应用也具有协同抗肿瘤活性。意大利一个研究组对表达EGFR的人类卵巢癌（OVCAR3）、乳腺癌（ZR751，MCF10A ras）和结肠癌（GEO）细胞系给予ZD1839联合细胞毒药物（顺铂、卡铂、草酸铂、紫杉醇、多西紫杉醇、表阿霉素、依托泊甙、拓扑替康和raltitrexed）进行观察，发现ZD1839联合上述任何一种化疗药物均有协同抑制肿瘤细胞生长的作用，其中铂类药物（CBP和DDP）和ZD1839合用可增强非小细胞肺癌A549生长抑制能力达3～5倍［14］。AlHazzaa A等［15］也研究发现将ZD1839与顺铂联合应用治疗头颈部癌（SCC15）证实ZD1839能明显提高顺铂的抗肿瘤作用。顺铂是宫颈癌治疗中最常用的化疗药物，我们的结果表明，ZD1839能明显增强顺铂对Siha和Hela细胞的抑制作用。用Burgi法计算的联合用药Q值分别为1.06±0.03、1.13±0.01。
Hopfner M等［16］报道ZD1839可诱导肝癌细胞株细胞周期停滞并可促进细胞凋亡。在我们的实验研究中，流式细胞仪分析显示，ZD1839也可诱导宫颈癌Siha、Hela细胞停滞于G1期，当ZD1839浓度为10μmol/L时G1期的比值分别从对照组的45.08%、45.58%上升到67.22%、72.87%（P<0.05）。随着ZD1839浓度的增加Siha、Hela细胞凋亡比率有逐渐增加的趋势，这表明ZD1839对Siha、Hela细胞抗肿瘤细胞增殖可能主要是通过促凋亡和诱导细胞周期阻滞而起作用。
总之，由于EGFR在多种类型的实体瘤中呈现高表达，且与对治疗的低反应率、低生存率和疾病进展密切相关，实验研究显示通过多种途径作用于EGFR的信号转导通路，可以抑制肿瘤细胞增殖、减少肿瘤血管生成和肿瘤细胞转移，以及增加肿瘤细胞的凋亡率。我们的体外实验也证实了ZD1839单药以及联合传统的细胞毒性药物均对宫颈癌细胞具有明显的抗增殖和促凋亡作用。以上提示其可能具有诱人的临床应用前景，但EGFR靶向治疗中还存在着一些问题有待解决，如抗体的异质性，以及突变引起的耐药性，单药临床有效率低（仅15%左右［17］）等，ZD1839对宫颈癌细胞的影响和作用机制以及今后的临床应用值得进一步深入探讨。
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